“十五”期间国家863计划以自主知识产权的可替代抗生素和安全高效促生长保健剂创制为目标,提高了我国生物饲料添加剂的创制和产业化水平,显著增强了我国畜禽产品的质量和国际竞争力。
(1)结合现代波谱方法和生化和分子生物学手段,成功研制了糖萜素饲料添加剂,开展了糖萜素对鱼作用的研究,结果表明糖萜素具有提高鱼类生长性能的作用,完成了山茶属三萜皂甙对南美白对虾生长性能、肉质和抗病效果、糖萜素-II对猪屠宰性能和肉质影响的研究。完成了糖萜素对黄羽肉鸡生长、肉质和抗体水平作用的研究获得了多项国际和国内发明专利权和我国新饲料添加剂批文,制订了糖萜素饲料添加剂质量标准,建设了年产100吨糖萜素饲料添加剂生产基地。
(2)分离到一个高比活木聚糖酶编码基因,酶的比活性达到15000IU/mg酶蛋白,较一般的木聚糖酶高30倍,在饲料中的添加量只需国外产品的50%~70%就能达到同样的饲喂效果,利用重组酵母生产,发酵效价达到11000IU/mL发酵液以上,高于目前国外的技术水平,目前已建立稳定的发酵工艺和后加工工艺。分离克隆到甘露聚糖酶基因4个,适宜于在饲料工业中应用。对抗菌肽Tac进行了分子改良,使其抗菌效率显著提高,构建了高效表达抗菌肽的基因工程酵母,完成了工程菌的小试发酵工艺研究,抗菌肽的表达量达到0.5mg/mL。在GenBank中注册新基因7个,均为原创性研究,新基因具有自主知识产权。
(3)建立和优化了产酶发酵双诱导技术体系。在国内首次建立和报道了分离菊芋和菊苣菊糖的离子色谱法,基因工程酵母产菊粉内切酶和酶水解菊粉制备菊粉寡糖的中试工艺。国内外首次实现新型广谱LfcinB衍生物在原核生物中的融合表达,获得一优良微生物菌株并注册专利保护,通过酶受体专一性定向调控酶合成产物中目标蔗果寡糖的含量,有利于简化高纯度GF2的生产,建立了产酶发酵和酶催化转移合成的同步反应工程,将微生物选择发酵单糖特性引入高纯度低聚果糖的制备中,降低了生产成本。建立了先筛选后分离的乳酸杆菌筛选新模型的方法,打破传统工作量繁杂的先分离后筛选的筛选模型。发现乳酸杆菌TS16、T9、TS6、T27、T24、T29有作为益生菌的潜力,同时发现了菊粉对乳酸杆菌的独特促进作用,首次建立了苜蓿黄酮的紫外检测方法。
(4)系统研究了大豆生物活性肽的制备工艺,系统研究了高效新菌株的特性和安全性,并对大豆生物活性肽混合物进行超滤、纳滤分离工艺进行了研究,为工业化生产大豆生物活性肽提供了理论、技术及设备支持。运用超滤和纳滤技术对发酵所得的大豆活性肽混合物进行分离、纯化,采用优化工艺,研究发现在日粮中添加大豆活性肽可显著降低料蛋比,提高产蛋率和蛋黄色度,提高胸肌率和腿肌率,降低腹脂率,提高了蛋白质的合成,减少了脂肪的沉积,有效改善了胴体品质。SAP对畜禽机体细胞免疫和体液免疫功能有极明显的刺激和调控作用,大豆肽可代替抗生素添加在饲料中用于提高动物免疫力,替代抗生素等药物促生长保健剂,能极显著抑制大肠杆菌和其他一些需氧菌尤其是沙门氏菌的生长繁殖。